FLAG標(biāo)簽是一種常用于分子生物學(xué)研究中的融合標(biāo)簽，常用于蛋白質(zhì)的純化、定位、定量以及免疫檢測(cè)。它是由八個(gè)氨基酸組成的短肽（Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，簡稱DYKDDDDK）構(gòu)成，通常與目標(biāo)蛋白融合，以便于通過抗FLAG抗體對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)和純化。由于其特異性強(qiáng)且簡單易用，F(xiàn)LAG標(biāo)簽廣泛應(yīng)用于多種實(shí)驗(yàn)中，尤其是在重組蛋白的研究中。
1.小巧易用：
FLAG標(biāo)簽只有八個(gè)氨基酸，其小巧的結(jié)構(gòu)使得其對(duì)目標(biāo)蛋白的功能和結(jié)構(gòu)干擾較小，因此不會(huì)影響目標(biāo)蛋白的生物學(xué)活性。
2.高特異性：
特異性高，抗FLAG抗體能與該標(biāo)簽產(chǎn)生強(qiáng)烈的結(jié)合反應(yīng)，這使得FLAG標(biāo)簽在純化和檢測(cè)過程中非?？煽?。
3.免疫檢測(cè)方便：
能通過免疫印跡、免疫沉淀、免疫熒光等技術(shù)進(jìn)行高效檢測(cè)，且可以通過多種形式的抗體檢測(cè)。
4.多用途：
不僅可以用于蛋白的表達(dá)和純化，還可以用于蛋白的定位研究、蛋白-蛋白相互作用研究、蛋白修飾檢測(cè)等多個(gè)方面。
應(yīng)用：
1.蛋白質(zhì)純化：
常用于蛋白質(zhì)的親和純化。通過與含有抗FLAG抗體的固相支持物（如親和層析樹脂）結(jié)合，可以高效地將目標(biāo)蛋白從復(fù)雜的樣品中分離出來。這個(gè)過程一般被稱為FLAG標(biāo)簽親和純化。
-親和層析法：在親和層析中，F(xiàn)LAG標(biāo)簽與抗FLAG抗體（通常固定在樹脂上）結(jié)合，通過洗脫步驟得到純化的目標(biāo)蛋白。
2.蛋白-蛋白相互作用研究：
可與其它標(biāo)簽或蛋白結(jié)合，形成融合蛋白，應(yīng)用于蛋白-蛋白相互作用的研究。通過免疫沉淀等技術(shù)，可以驗(yàn)證蛋白質(zhì)之間的相互作用，特別是在酵母雙雜交、拉下實(shí)驗(yàn)（Co-IP）等方法中應(yīng)用廣泛。
3.細(xì)胞定位研究：
在細(xì)胞生物學(xué)研究中，通常用于檢測(cè)目標(biāo)蛋白的亞細(xì)胞定位。通過抗FLAG抗體染色，可以明確目標(biāo)蛋白在細(xì)胞中的分布情況。例如，使用免疫熒光技術(shù)標(biāo)記FLAG標(biāo)簽，可以觀察蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位和動(dòng)態(tài)變化。
4.表面展示技術(shù)：
在細(xì)胞表面展示或病毒展示系統(tǒng)中，也常用于幫助標(biāo)記目標(biāo)蛋白。例如，在噬菌體展示技術(shù)中，F(xiàn)LAG標(biāo)簽可用于在噬菌體表面展示外源蛋白，從而篩選出具有特定結(jié)合活性的噬菌體。
5.蛋白修飾研究：
也可以用于研究目標(biāo)蛋白的翻譯后修飾，如磷酸化、糖基化等。通過抗FLAG抗體檢測(cè)，可以追蹤蛋白的修飾狀態(tài)，并通過免疫沉淀等方法進(jìn)一步分析。
6.抗體生產(chǎn)：
也廣泛用于生產(chǎn)抗FLAG抗體，尤其是在FLAG標(biāo)簽的蛋白研究中，抗FLAG抗體用于識(shí)別和純化目標(biāo)蛋白。此外，還可以應(yīng)用于篩選抗FLAG抗體。
7.疫苗和治療研究：
在疫苗開發(fā)過程中，F(xiàn)LAG標(biāo)簽常用于構(gòu)建融合蛋白，通過FLAG標(biāo)簽的檢測(cè)和純化，使得疫苗的生產(chǎn)更加簡便高效。此外，在一些基因治療研究中，F(xiàn)LAG標(biāo)簽也被用作蛋白標(biāo)記。
8.基因表達(dá)分析：
可作為一種標(biāo)記用于研究基因表達(dá)和目標(biāo)蛋白的合成。在轉(zhuǎn)基因小鼠、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞等模型中，使用FLAG標(biāo)簽可以幫助研究者快速定位和驗(yàn)證轉(zhuǎn)基因蛋白的表達(dá)情況。
9.高通量篩選：
在高通量篩選中，利用FLAG標(biāo)簽的檢測(cè)可以快速識(shí)別特定的目標(biāo)蛋白或篩選出具有特定活性的分子。由于其特異性高，篩選結(jié)果更加可靠。
FLAG標(biāo)簽蛋白的優(yōu)點(diǎn)：
1.低干擾性：FLAG標(biāo)簽小巧，不干擾目標(biāo)蛋白的功能或結(jié)構(gòu)。
2.高特異性：抗FLAG抗體的親和力強(qiáng)，能夠高效識(shí)別和檢測(cè)目標(biāo)蛋白。
3.多種檢測(cè)手段：能夠通過多種技術(shù)（如免疫印跡、免疫沉淀、免疫熒光等）進(jìn)行檢測(cè)和純化。
4.適用性廣：適用于各種細(xì)胞類型和生物體系，包括細(xì)菌、酵母、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等。
更新時(shí)間：2025-06-30
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